#FDA #NGS #противовирусные #прогресс #регуляторика

На днях Администрация по продуктам питания и лекарствам США (FDA) опубликовала указания для отрасли «Технические спецификации: предоставление данных о секвенировании следующего поколения в подразделение по противовирусным препаратам». Указанное подразделение FDA, как следует из названия, занимается оценкой клинической и микробиологической эффективности противовирусных лекарств, входя в Офис новых лекарств Центра экспертизы и изучения лекарств. Последним руководит непотопляемая Janet Woodcock, которая выступает с личными докладами в Конгрессе, т. е. помимо руководителей FDA на слушания пригашают и лично ее, руководители других центров: CBER, CFSAN, CDRH и др. редко удостаиваются такой чести.

Смысл документа даже не столько в том, что разработчики обязаны предоставлять FDA данные о секвенировании геномов патогенных вирусов, против которых разрабатываются новые противовирусные лекарства, а в том, как они обязаны это делать. Это еще один из признаков того, как ведется разработка на современном уровне, и как дела обстоят у нас. Важно подчеркнуть, что создание стандартизирующего документа означает, что само требование о предоставлении данных NGS не является новым, наоборот, накоплен существенный опыт, которого оказалась достаточно для инициирования процедур стандартизации.

Для сравнения поищите в государственном реестр лекарственных средств «мед» (мёд). Путь введения заслуживает отдельного внимания/удивления.

#FDA #онкология #инновация #регуляторика #OCE #

FDA одобрила первое заявление на новое лекарство (NDA) в рамках пилотной экспертизы онкопрепарата в реальном времени (Real-Time Oncology Review, RTOR)

FDA одобрила алпелисиб (Новартис) для лечения рака молочной железы в комбинации с фулвестрантом и сопутствующим диагностикумом на 3 месяца раньше срока благодаря программам RTOR и «Помощь в оценке» (Assessment Aid, AAid).

RTOR открывает для FDA доступ к ключевым данным до официальной подачи заявления об одобрении (NDA), позволяя команде экспертов приступить к экспертизе раньше и начать диалог с заявителем до фактической подачи заявления.

Пилотная AAid же основана на шаблоне междисциплинарной экспертизы, разделенном на две части: позицию заявителя и оценку FDA. Цель — сосредоточить письменную экспертизу FDA на критическом мышлении и согласованности, а также снижении времени, затрачиваемого на административные задачи, например форматирование. Заполнение шаблона начинается на этапе клинической разработки (IND).

Эти два подхода является новыми регуляторными инструментами, созданными в относительно недавно организованном в FDA Онкологическом центре совершенства (Oncology Center of Excellence, OCE). Возможно, в будущем в таком процессе экспертизы смогут участвовать разработчики и других групп лекарств.

Тем самым все сильнее размывается граница между задачами разработчика и задачами регулятора. При правильной организации это может позволить сэкономить на транзакционных издержках, ускорив выход новых лекарств.

#edX #биохимия #Гарвард #глицин #головной_мозг #лекарства

Заканчиваю смотреть второй курс по биохимии, свободно доступный на edX (поиск по Мета-Ф #биохимия), который ведет Ален Виль (Alain Viel). В отличие от курса биохимии MIT, это классический университетский курс биохимии. Структура курса очень похожа на то, что преподавали нам (у меня биохимия была в 2002–2003 гг.). Однако гарвардский курс гораздо более полный и глубокий, в том числе в связи с большими достижениями в области биохимии, которые произошли за истекшие 16–17 лет.

Особо интересными и полезными показались две лекции, посвященные биохимии глицина в головном мозге, 4.3.2 и 4.3.3:

Поскольку глицин является нейромедиатором в ЦНС, его содержание в нейронах строго регулируется. Глицин, наряду с другими небольшими нейтральными аминокислотами, такими как аланин, пролин и серин, не проникает через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ): пассивная диффузия невозможна из-за их полярности, переносчики для различных вариантов активного или облегченного транспорта отсутствуют. Небольшие нейтральные аминокислоты, включая глицин, являющиеся заменимыми, переносятся аланин-предпочитающим белком-переносчиком (A-типа). Белок-переносчик A-типа отсутствует на поверхности эндотелиоцитов ГЭБ со стороны просвета кровеносного сосуда, т. е. механизм активного транспорта глицина сквозь ГЭБ в нейроны отсутствует.

В противоположность этому белок-переносчик A-типа располагается на мембране эндотелиоцита со стороны нейронов, принимая глицин и другие небольшие нейтральные аминокислоты со стороны нейронов и перенося их внутрь эндотелиоцита и далее выводя в кровь. Такие системы переносчиков активно участвуют в регулировании концентрации аминокислот в межклеточной жидкости и особенно важны для поддержания низких концентраций аминокислот-нейромедиаторов, таких как глутамат, аспарат и глицин.

Для использования в качестве медиатора и для синтеза белка нейроны используют глицин, синтезируемый астроцитами (глиальные клетки, питающие нейроны) из серина путем деметилирования последнего. Реакция катализируется серингидроксиметилтрансферазой, коферментом которой является тетрагидрофолат, акцептирующий метиленоксидную группу серина. Поскольку серин также практически не проникает из кровеносного русла через ГЭБ, он синтезируется de novo из 3-фосфоглицерата, являющегося предшественником фосфоенолпирувата в гликолитическом цикле, т. е. в большом количестве присутствующем в клетках, включая астроциты.

Таким образом, базовая биохимия показывает, почему глицин, поступающий с пищей или в составе принимаемых внутрь #лекарств, не проникает через ГЭБ, а синтезируется в ЦНС заново, чтобы обеспечить строгое регулирование его содержания в нейронах.

Отличный курс, позволяющий, в числе прочего, лучше разбираться в лекарствах и псевдолекарствах.

#лекарства #дети #Евросоюз #доступность #регламент #комитет

Низкая доступность лекарств для детей (отсутствие нужных действующих веществ, форм дозирования, формуляций и дозировок) не только наша проблема — она носит глобальный характер. Однако за рубежом на протяжении многих лет существует законодательство, обязывающее разработчиков лекарственных препаратов в соответствующих случаях разрабатывать лекарства для детей. Такая т. н. педиатрическая разработка, как правило, начинается еще на этапе основной клинической разработки лекарственного препарата (примерно на 2-й фазе) и предполагает дополнительное изучение режима дозирования у детей в зависимости от их возраста, а также создание удобных форм дозирования и дозировок, чтобы не возникало сложностей, к примеру, с делением крупных таблеток или чтобы не было токсичных для детей (особенно маленьких детей) вспомогательных веществ и т. п.

Интересен опыт Европейского союза, в фармацевтическом законодательстве которого есть Регламент (EC) № 1901/2006 о лекарственных препаратах для детской популяции. Он не только подробно регулирует многие процессуальные аспекты разработки и вывода на рынок лекарств для детей, но и создает соответствующую инфраструктуру, в частности Педиатрический комитет (PDCO) в составе Европейского агентства по лекарствам (EMA). Однако сегодня мне хотелось бы остановиться на другом.

Переводя этот регламент и готовя его к опубликованию в открытом бесплатном доступе, меня привлек 32-й пункт преамбулы, который гласит:

«Педиатрический комитет после консультации с Комиссией, государствами-членами и заинтересованными сторонами обязан сформировать перечень терапевтических нужд детской популяции, который должен подвергаться регулярному обновлению. Указанный перечень должен содержать существующие лекарственные препараты, применяемые в детской популяции, и освещать терапевтические нужды такой популяции, а также приоритеты по изысканиям и разработке. Тем самым он должен позволять компаниям легко находить направления для развития бизнеса, давать Педиатрическому комитету возможность лучше определять нужность лекарственных препаратов и исследований при оценке проектов планов исследования у детей, освобождений и отсрочек, а также служить медицинским работникам и пациентам в качестве источника сведений, доступных для поддержки принятия ими решений при выборе лекарственных препаратов».

На основании этого пункта преамбулы регламента сформулирована статья 43, 2-й параграф которой гласит: «При составлении перечня терапевтических нужд необходимо учитывать распространенность состояний в детской популяции, серьезность состояния, доступность и пригодность альтернативных вмешательств при состоянии в детской популяции, включая эффективность и профиль нежелательных реакций таких вмешательств, в том числе все характерные для детей аспекты безопасности, а также все результаты исследований, полученные в третьих странах».

А вот здесь, на сайте EMA, уже находится сам перечень, точнее, система документов, составляющих перечень.

Хорошо, когда бюрократическая система поддерживает здравоохранение, поддерживает пациентов и особенно наиболее уязвимые категории, включая детей. Именно поэтому мне приятно читать европейское или американское законодательство о лекарствах, поскольку оно логично и системно, а также посвящено светлому.

Сам же регламент достаточно большой, к тому же в его развитие принят целый комплекс подзаконных актов и разъяснительных документов. Только такой системный подход позволяет двигаться в сторону доступности лекарств для детей, тогда как декларативные или несистематизированные обрывочные меры всегда обречены на провал. Законодательство о лекарствах является одним из самых сложных потому, что эта сфера одна из самых комплексных в общественной жизни, поэтому простых решений здесь быть не может, должны постоянно работать большие коллективы людей, чтобы у нас были хорошие лекарства.

#нейробиология #когнитивная_психология #бихевиоризм #Kahneman #часть1

В своем Behave (поиск по Мета-Ф #Behave) Роберт Сапольски несколько раз упоминал труд Даниэля Канемана «Thinking, Fast and Slow» (Мышление: быстрое и медленное, хотя переведенная на русский язык книга имеет заглавие «Думай медленно… решай быстро»). После того как Канеман побывал у Сэма Харриса в подкасте Making Sense, понял, что книгу надо прочитать. Пожалуй, я впервые прочитал труд лауреата Нобелевской премии в области экономики (хотя на мой взгляд, это работа в области биологии 🙂).

Книга посвящена процессам мышления и принятия решений. Несмотря на то что в ней отводится лишь небольшое место первопричинам мыслительных процессов у человека, описываемые в книге закономерности очень хорошо и понятно усваиваются после нейробиологии Роберта Сапольски. Действительно, особенности нашего мышления имеют нейробиологическую и эволюционную природу и не могут рассматриваться в отрыве от них. В результате прослушивание книги было не чем-то новым и неизведанным, а, скорее, осознанием и более глубоким пониманием тех процессов, которые лежат в основе принятия людьми решений.

В произведении Канеман выделяет две системы, вносящие вклад в принятие решений. Система 1 — решения принимаются быстро, по внешним признакам («то, что видишь, то и есть»), на основании запомнившихся событий, предлагаются простые быстрые «очевидные» решения и т. д. С точки зрения нейробиологии системе 1 соответствуют лимбическая система, вентролатеральная префронтальная кора, островковая доля и др., то есть все, кроме дорсолатеральной (заднебоковой) префронтальной коры. Система 1 быстро определяет выражение эмоций на лице, «помнит» о плохом и болезненном опыте.

Система 2, которая по сути является эквивалентом дорсолатеральной префронтальной коры, отвечает за «классическое» мышление, расчеты, продумывание. Система ленива (процесс энергозатратен, определяется индивидуальными особенностями анатомии коры) и часто «прислушивается» к системе 1. Однако она не только продумывает правильные решения в конкретной ситуации, что требует времени и волевых усилий, но и нередко рационализирует упрощения, оправдывает свое неправильное поведение («я съем этот десерт, потому что заслужил», хотя по логике никто не заслуживает пустых калорий и диабета) или находит им объяснения и доказывает себе правильность, нежели действительно критикует предложения системы 1.

Система 1 всегда имеет готовые мнения, быстро, с первого взгляда, не задумываясь предлагает алгоритмы действий, не устает. В частности, она ведет постоянный анализ окружения, всё ли в порядке / не в порядке. Быстро предлагает системе 2 варианты развития событий, поскольку в обычных условиях исполнительный контроль принадлежит системе 2, однако он утрачивается в различных неблагоприятных условиях (стресс, перегрузка, голодание дорсолатеральной префронтальной коры, снова см. #Behave).

Система 2 принимает решения долго, отвлекая большие ресурсы (иногда с трудом). В это время могут расширяться зрачки (адреналин, краткосрочный стресс), возникает отсутствующий взгляд. Если вы шли и вам задали вопрос, сколько будет 17*24, вы (если не знаете ответ), скорее всего, остановитесь и начнете вспоминать правила умножения с необходимостью сохранения в оперативной памяти промежуточных значений. Эта нетривиальная в повседневной жизни многих людей задача требует 100%-ного внимания. Как только решение найдено или решено, что задачу решить невозможно в настоящее время, стресс проходит, зрачки сужаются, «возвращается сознание», можно возобновить прерванную деятельность. Еще одним примером является остановка или замедление, когда люди читают текстовые сообщения, особенно важные.

Продолжение следует…

#нейробиология #когнитивная_психология #бихевиоризм #Kahneman #часть2

В начале книги Thinking, fast and slow, давая вводное описание системе 1 и системе 2, Канеман констатирует, что люди являются хорошими интуитивными филологами: уже в 4-летнем возрасте дети автоматически усваивают правила грамматики родного языка. Это объясняется тем, что речь во многом находится в ведении системы 1. Однако без хорошей тренировки люди — плохие интуитивные статистики, поскольку за статистическую обработку информации отвечает система 2, а она требует напряжения, быстро истощается, «ленива». Даже профессиональные статистики обычно являются плохими интуитивными статистиками, то есть чаще всего в обыденной жизни они полагаются на «решения, подсовываемые» системой 1, нежели решения, выверенные системой 2. По аналогии с владением языком, люди также обычно хорошо определяют по мимике эмоции, краткосрочные намерения, прямые угрозы — это область ответственности системы 1.

Одним из примеров негативных сторон принятия решений на основе системы 1 является гало-эффект. Система 1 на основании небольшого числа признаков делает далеко идущие выводы. Например, люди склонны больше доверять симпатичным менеджерам по продажам, поскольку внешняя красота экстраполируется на остальные человеческие качества (честность, порядочность, правдивость, профессионализм), однако это может не иметь место. Этим давно пользуются компании, «выставляя на витрины» красивых людей, чтобы заставить систему 1 принять, порой, неоправданное решение. Действительно ли девушки в автосалонах хорошо разбираются в автомобилях?

Поддаться гало-эффекту — все равно, что сделать заключение на основании малой выборки. Малые выборки иногда могут иметь резко выделяющиеся значения (выбросы), которые могут некорректно характеризовать генеральную совокупность, в результате возникает смещение (систематическая ошибка, bias). Именно поэтому данные на малых выборках («британские ученые на 20 или даже 200 добровольцах показали, что…») нередко недостоверны (но могут быть и достоверны). И именно поэтому принимать решения на основании оценки малой выборки нередко ведет к ошибкам.

Еще одним автоматизмом в принятии решений является наше желание видеть закономерности там, где их нет. Это очередной эволюционный механизм: «львы бегут в мою сторону — они бегут за мной — надо спасаться». В целом этот механизм был направлен на защиту (хотя львы могли бежать по другим причинам). В жизни не все события имеют причинно-следственную связь для субъекта принятия решений, а могут быть случайными событиями, совпадениями. Показано, что в исследованиях показано биржевые трейдеры, консультанты и аналитики, как правило, (почти) не оказывают никакого влияния на успешность компаний на фондовых рынках, однако многие компании боятся себе в этом признаться, боятся утратить "чувство контроля" (которого нет).

Аналогично принятие решений на основании эмоций нередко необоснованно. Например, люди больше бояться умереть в автокатастрофе или от урагана, нежели от инсульта или бронхиальной астмы, в связи с непропорционально большим освещением катастроф и катаклизмов в СМИ, тогда как редко можно увидеть/услышать статистику смертности от инсульта или астмы, хотя от этих заболеваний умирают в несколько раз чаще, чем от аварий и катастроф. Эмоциональные решения — система 1.

Еще одним важным вариантом заблуждений, описываемым в книге, является ориентированность на репрезентативность, нежели базовую частоту. Приводится такой пример: «молодой человек, угрюмый, замкнутый, любит уединенность». Насколько вероятно, что он библиотекарь, программист, врач, работник социальной сферы… Многие респонденты отвечали «библиотекарь или программист», ориентируясь только на типичную характеристику библиотекарей и программистов, не беря в расчет их распространенность в популяции, в которой больше врачей и работников социальной сферы, то есть игнорировалась базовая частота распространенности признака (base rate). Однако она в большинстве случаев важнее распространенности. В медицинском вузе редким заболеваниям, порой, уделяется непропорционально большее внимание — в ущерб традиционным «убийцам».

Смещение системы 1 возникает еще и потому, что решения, предлагаемые ей, основываются на том, что «она видит», или что легко извлекается из памяти либо основано на личном опыте, но это может не согласовываться с базовой частотой или реальным положением вещей. Например, известно, что в памяти гораздо лучше откладываются негативные события, пиковые эффекты и последние зафиксированные ощущения.

Эксперимент: людям предлагали опустить руку в холодную воду и выдержать 60 с (длительность не сообщали); субъекты испытывали определенный дискомфорт. Спустя 7 минут эксперимент повторяли, но на 61-й секунде температуру повышали на 1 градус (с 14 до 15). Второй эпизод с водой в сумме длился 90 с (длительность эпизода не сообщали). В результате у многих возникал положительный настрой из-за улучшения состояния. Затем людям предлагали выбрать, какой из эпизодов повторить. Многие выбирали второй с «улучшением», хотя реально страдали они меньше в первом, но он запомнился как менее приятный. Для многих распавшийся брак запоминается последними негативными событиями, хотя в нем было и много хороших эпизодов (как правило).

Именно поэтому нужен самоконтроль. Нужно усилием воли пытаться проанализировать ситуацию с разных сторон, тщательно обдумать ее, прежде чем принять решение, а для этого надо попытаться остановить систему 1 от быстрого реагирования на основании только того, что видно.

Продолжение следует…

#нейробиология #когнитивная_психология #бихевиоризм #врачи #Kahneman #часть3

Мы везде автоматически ищем причины, поскольку система 1 эволюционно заточена находить причинно-следственные связи (закономерности в возникновении разных событий), но она тяжело воспринимает случайные стохастические события, поэтому здесь нужна помощь системы 2 (дорсолатеральной префронтальной коры). Из-за плохого автоматического понимания случайности некоторых событий нам тяжелее понимать регрессию к среднему (у высоких родителей с большей вероятностью родится ребенок ростом ниже них, и наоборот у низкорослых родителей обычно рождаются более высокие дети). Нам легче понимать истории, нежели описание несвязанных событий.

Из-за особенностей работы системы 1 мы подвержены хайндсайту (hindsight, «надо было поступить по-другому»): наше мнение изменяется в зависимости от возникшей ситуации и заставляет быстро забыть прошлое противоположное мнение (в частности, прошлые противоположные мнения кажутся почти нереальными). От хайндсайта страдают многие, в том числе врачи. Например, если после хирургической операции, имевшей низкий риск, возник плохой исход и был подан судебный иск, то судебное жюри нередко начинает поддаваться хайндсайту, рассуждая на тему, что нужно было сделать сверх того, что сделано, вместо того чтобы рассматривать правильность процесса принятия решений. «Это словно написать на доске невидимыми чернилами, которые проявляются по прошествии времени и ругать людей за то, что они сразу не увидели написанное». Больше всего от hindsight’а страдают люди/профессии, принимающие решения за других, включая врачей и консультантов. При этом успехи ценятся невысоко, опять же из-за смещения в сторону запоминания плохих событий, нежели хороших.

В ситуациях, подобных неуспешной хирургической операции с низким риском, врачи — для защиты себя — назначают больше анализов и обследований. В результате повышенная ответственность может приводить к необоснованным затратам для перестраховки, что также ложится на плечи пациентов и систем здравоохранения, ибо ведет к перераспределению ресурсов для страхования небольших рисков.

Восприятие мира через систему 1 заставляет думать, что мир прост, понятен, предсказуем, основывается на историях, однако мир не создан для понимания его приматами, много основано на случайности/удаче. Такое восприятие нередко формирует иллюзию контроля над ситуацией, которая успокаивает тревогу. Однако важно помнить, что «успех — старания и удача, большой успех — чуть большие старания и очень большая удача», т. е. случайность. Именно так надо воспринимать большинство успешных людей (ученых, специалистов, бизнесменов, политиков, артистов, экспертов и т. д.).

Когнитивная иллюзия (игнорирование регрессии к среднему и стохастичности большинства сложных явлений) заставляет думать, что успех объясняется профессионализмом, нежели удачей/случайностью, особенно в таких областях, как финансовые рынки. При неуспешном предсказании новых событий эксперты ведут себя раздраженно, находя множество «разумных» объяснений, почему они ошиблись (например, ошиблись по срокам, но были правы в остальном, либо возникло непредвиденное событие или же было определено правильное направление и т. п.), необоснованно принимая на свой счет провальность прогноза.

В книге много места отведено вопросу интуиции, которая хорошо работает только в высокоупорядоченных регулярных сферах (пожары, сестринский уход за тяжелобольными пациентами). Однако интуиция практически не работает в непредсказуемых сферах (финансовые рынки, политика, долгосрочное прогнозирование клинических исходов для отдельного человека, будущие цены на товары). В упорядоченных сферах простые алгоритмы принятия решений (пока) уступают решениям, принимаемым профессионалами, тогда как в неупорядоченных сферах простые алгоритмы гораздо эффективнее экспертов. Например, шкала Апгар для оценки будущих медицинских осложнений у новорожденного позволяет с высокой эффективностью определять надвигающиеся проблемы. Аналогично 5-разрядная шкала определения цены вина Бордо с 90%-ной успешностью прогнозирует цену на этот напиток (он торгуется в качестве атрибута роскоши), тогда как эксперты несмотря на все тонкости и ухищрения способны определять цену примерно с 50%-ной эффективностью.

Интересно, что интуиция хорошо работает в области анестезиологии. Если анестезиолог «шестым чувством почуял неладное, то операционной бригаде надо приготовиться, ибо что-то пошло не так, что еще не осознал сам анестезиолог, но его системы тревоги уже успели сработать». Краткосрочное предсказание в относительно упорядоченной среде с хорошей обратной связью обычно эффективно. В противоположность этому интуиция/прогнозирование у радиологов менее эффективны, поскольку ориентированы на долгосрочные временные горизонты, при этом имеет место слабая обратная связь от пациентов.

Наконец, интересно обсуждение влияния опыта и памяти на принятие решений. Опыт уступает памяти, то есть формируется смещение (bias, систематическая ошибка). Решения принимаются на основании воспоминаний (а хорошо запоминаются плохие, пиковые и последние переживания). Более того, решения о будущих действиях направлены на максимизацию приятных воспоминаний, а не опыта. Т. н. тирания запоминающего «я». Так например, некоторые люди при планировании отпуска стараются выбрать места, чтобы сфотографировать и рассказать, запомнить, а не реально пережить ощущения. Аналогична ситуация с записыванием зрителями концерта или выступления на телефон.

Интересен эксперимент по выбору между амнезией и анестезией. Людей спрашивали, что вы выберете: подвергнуться крайне болезненной операции, но полностью забыть о ней, приняв лекарство, либо быть в сознании, но под анестезией. Большинство людей выбирали пережить болезненный опыт, но забыть о нем, нежели помнить об операции, пусть и без боли. Это с интересной стороны характеризует наше восприятие.

Данные три поста получились относительно несистемными и обрывочными, но книга (20 часов прослушивания) очень логична и систематизирована. Она определенно заслуживает внимания, в том числе медиков, а не только псхологов, экономистов и финансистов. Однако, как отмечал до этого, ее лучше читать после хорошего погружения в нейробиологию.

#UK #MHRA #статистика #регистрация #экспертиза #сроки

В рамках политики прозрачности Агентство по лекарствам и медицинским продуктам Соединенного Королевства Великобритании и Северной Ирландии (MHRA) опубликовала очередные статистические данные с июня 2018 по июнь 2019 гг., на этот раз речь о статистике по срокам (i) начала и (ii) завершения экспертизы, а также (iii) принятия решений по заявлениям:

- о регистрации — чисто национальные процедуры

- регистрации — децентрализованная процедура, в качестве референтного государства-члена (РГЧ)

- регистрации — децентрализованная процедура, в государства признания

- внесении (a) изменений II типа / основных групп изменений; (b) незначимых изменений / неосновных групп изменений — чисто национальные процедуры и в качества РГЧ в децентрализованной процедуре.

Что меня заинтересовало:

Регистрация по национальной процедуре: в 50 % случаев первый эксперт приступает к экспертизе в течение 20–50 дней после успешной валидации, в 90 % случаев — в течение 70–100 дней. То есть эксперты начинают проверку документов не тотчас (в России также).

Сроки завершения экспертизы незначимых/второстепенных изменений (т. е. IA, IA с немедленным уведомлением, IB и группы незначимых изменений не старше IB) выдерживаются — 30 дней как в национальной процедуре, так и децентрализованной, когда MHRA действует в качестве национального уполномоченного органа (НУО) РГЧ.

Сроки завершения экспертизы значимых/основных изменений (т. е. II типа и группы изменений с по меньшей мере одним изменением II типа) в целом выдерживались — 90 дней. Однако MHRA один раз сорвала сроки в национальной процедуре, и дважды в децентрализованной процедуре (НУО РГЧ).

Сроки завершения экспертизы заявлений о регистрации в целом выдерживались. Целевой срок для национальной процедуры — 150 дней (в среднем экспертиза завершалась в течение 100 дней), целевой срок для НУО РГЧ — 70 дней в децентрализованной процедуре.

Общие сроки принятия решения по заявлению (с момента успешной валидации до выдачи решения без учета остановки сроков течения для ответа заявителей на запрос)

- по 90 % заявлений о внесении изменений II типа и групповых изменений, национальные процедуры — 140–380 дней (лимит — 90 дней)

- по 90 % заявлений о внесении изменений II типа и групповых изменений, НУО РГЧ — 60–240 дней (лимит — 90 дней)

- по 90 % заявлений о регистрации, национальные процедуры — 250–650 дней (лимит — 210 + 30 дней)

- по 90 % заявлений о регистрации, НУО РГЧ — 240–250 дней (лимит — 210 + 30 дней)

- по 90 % заявлений о регистрации, НУО государство признания — 240–250 дней (лимит — 210 + 30 дней)

Выводы: действуя в рамках общих процедур с другими государствами ЕС (децентрализованная процедура) всегда укладывалась в установленные законом сроки, тогда как в рамках чисто национальной процедуры по сложным изменениям и регистрации MHRA не выдерживала общий срок, равный 210 + 30 дней.

Важно учитывать, что по национальным процедурам проходят только относительно простые препараты: либо давно зарегистрированные, либо генерики и простые гибриды, хорошо изученные лекарства, гомеопатия и растилка. Сложные препараты — централизованная процедура.

Все это важно потому, что в России сроки сильно занижены, что ведет к принятию некачественных решений о регистрации. Не соблюсти срок у нас нельзя, накажут, а у них можно, если вопрос важный.

#статьи #наука #регуляторика #article #CurrentlyReading #КлинФарм #биофармацевтика #токсикология 💊

Дайджест статей (doi — по запросу) по разработке и регуляторике лекарств, а также по другим темам, которые показались интересными и полезными, прочитанных / просмотренных за последние 3 недели. К некоторым статьям привел комментарии, поскольку содержащиеся в них сведения счел заслуживающими более пристального внимания.

#генная_и_клеточная_терапия
Optimizing oncolytic virotherapy in cancer treatment
Комм.: хороший обзор по текущей обстановке в этой области. Препараты медленно, но регистрируются, генетическая модификация сильно повышает специфичность.

#производство
Why We Need Continuous Pharmaceutical Manufacturing and How to Make it Happen
Комм.: очень хорошая заметка о важности непрерывного производства. Сейчас оно в начале своего пути, но когда оно будет внедрено в полную силу, современная фармацевтика сильно изменится. Многие сегодняшние специалисты потеряют работу из-за полной автоматизации, производства могут быть возвращены в такие страны, как США и государства — члены ЕС, поскольку дешевая рабочая сила более не будет требоваться. Жаль, что мы в отстающих.

#биотехнология_и_биоанализ
Compensated Hydroxyl Radical Protein Footprinting Measures Buffer and Excipient Effects on Conformation and Aggregation in an Adalimumab Biosimilar
Комм.: и снова о важности мельчайших нюансов в конформации и коллоидной стабильности белковых препаратов, включая антитела; новые технологии позволяют еще глубже характеризовать различия. Пример с биоаналогом адалимумаба.

Evaluating a Multiscale Mechanistic Model of the Immune System to Predict Human Immunogenicity for a Biotherapeutic in Phase 1
Комм.: поскольку иммуногенность является серьезной проблемой в разработке белковых препаратов, активно ведется работа по переносу оценок на более ранние этапы с подключением моделирования. В данной работе показаны возможности комбинирования ранних исследований с in silico моделированием.

TCPro: an In Silico Risk Assessment Tool for Biotherapeutic Protein Immunogenicity
Комм.: еще одна статья по компьютерному моделированию иммуногенности на биотерапевтики.

How logically impossible patents block biosimilars
Комм.: о необходимости наведения порядка в патентном законодательстве США, чтобы оригинаторы не могли злоупотреблять монопольным положением на рынке.

Choice of parvovirus model for validation studies influences the interpretation of the effectiveness of a virus filtration step
Комм.: подписался на новый журнал по биопрепаратам, Biologicals. Статьи интересные. Валидация вирусной безопасности — один из важнейших этапов производства биопрепаратов. У нас почти не проводится. В случае бактериальных клеток должна быть валидация отсутствия фагов и т. п.

Quality Controls in Ligand Binding Assays: Recommendations and Best Practices for Preparation, Qualification, Maintenance of Lot to Lot Consistency, and Prevention of Assay Drift

#биофармацевтика
Compounded Topical Pain Creams to Treat Localized Chronic Pain
Комм.: в Европе и США популярны официнальные лекарственные препараты, т. е. изготовляемые в аптеках. В случае противовоспалительных кремов показано, что из-за отсутствия надлежащей разработки и стандартизации технологии биодоступность таких приготовленных в аптеке кремов была нулевой.

Quantitative Structure–Property Relationship Approach in Formulation Development- an Overview
Комм.: делаются попытки оценки количественной зависимости «структура — свойства» в области разработки формуляций. Новые подходы стали доступны благодаря улучшению аналитических возможностей, вычислительных мощностей и накоплению данных о простых бинарных зависимостях. Новые инструменты моделирования позволяют с определенной надежностью предсказывать биофармацевтические характеристики создаваемых формуляций, а также предлагать оптимальные комбинации характеристик для создания новых формуляций с оптимальной биодоступностью.

#регуляторика
A comparison of EMA and FDA decisions for new drug marketing applications 2014‐2016- concordance, discordance and why
Комм.: хорошая статья о статистике расходящихся решений о регистрации между EMA и FDA. В целом согласованность решений достигает 98 %, что объясняется давним взаимодействием двух агентств. До начала такой координации число расхождений было выше. Вместе с тем расхождения продолжают оставаться и обусловлены во многих таких оставшихся случаях разными взглядами на интерпретацию данных об эффективности.

#токсикология
Drug-Induced Liver Injury — Types and Phenotypes
Комм.: интересная статья в NEJM о лекарственной гепатотоксичности. Это явление в клинической практике не столь частое, поскольку современная токсикологическая разработка ведет активный скрининг на предмет лекарственной гепатотоксичности и исключает соответствующие кандидаты. Вместе с тем проблема все равно остается и требует внимательного подхода клиницистов.

Elemental impurities in pharmaceutical products adding fuel to the fire
Комм.: элементные примеси продолжают представлять опасность, причем не только в составе лекарств, но и составе других потребляемых материалов (диетические добавки, продукты питания). Даже за рубежом не все гладко с элементными примесями в составе лекарств, однако работа по их контролю налажена, ICH Q3D заработал в полную силу.

#новые_лекарства
Clinical promise of next-generation complement therapeutics
Комм.: хороший обзор новых лекарств, нацеленных на комплемент, главным образом для блокады гиперергии (трансплантация, сепсис, гемодиализное воспаление и др.).

Emerging Applications of Metabolomics in Clinical Pharmacology
Комм.: значение метаболомики, ее субдисциплин и смежных с ней дисциплин для лекарств сильно увеличилось за счет доступности современных аналитических методов (варианты масс-спектрометрии). Профилировать биохимические процессы стало легче, причем метаболические сигнатуры лучше характеризуют физиологические и патологические состояния, позволяя оптимизировать диагностику и находить новые мишени лекарств.

Targeting metabolism to regulate immune responses in autoimmunity and cancer
Комм.: еще одна статья на стыке метаболомики и иммунологии. Поскольку активация иммунитета (также как и в случае онкогенеза) связана с усилением метаболизма (гликолиза, синтеза жирных кислот, пентозофосфатного пути и т. п.), то угнетение метаболизма в иммунных клетках способно оказывать положительное влияние при аутоиммунных патологиях.

#регуляторика #RA #ЕС #регистрация #PharmAdvisor #лекарства

Интерпретация Европейской комиссией и национальными регуляторами процедур регистрации лекарственных препаратов в Европейском союзе в открытом доступе на русском языке

Сегодня мы выкладываем в открытый доступ Главу 1 "Регистрация" Тома 2A «Процедуры регистрации» Тома 2 «Пояснения для заявителей» Правил регулирования лекарственных препаратов в Европейском союзе. Последний 11-й пересмотр документа датирован июлем 2019 г.

Несколько человек меня просили чуть глубже рассказать про регуляторику, поэтому решил выложить этот документ в открытый доступ, поскольку он является основой профессиональных знаний специалистов в области «Regulatory Affairs» (то, что у нас необоснованно называется «регистратор»).

Этот документ составляет Европейская комиссия. Он по сути является толкованием требования о регистрации, содержащееся в Директиве 2001/83/EC, Регламенте о централизованной процедуре (726/2004), Регламенте о передовой терапии (1394/2007), Педиатрическом регламенте (1901/2006) и Регламенте об орфанных лекарствах (141/2000). Ознакомление с этим документом позволит:

- не только понять регистрационные требования и процедуры в ЕС,

- но и лучше ориентироваться в документах ЕАЭС, особенно Правилах регистрации и экспертизы ЕАЭС,

- а также понимать недочеты в ФЗ-61.

Основные законоположения об условиях вывода лекарственных препаратов на рынок Европейского союза (marketing authorisation) приводятся в титуле III Директивы 2001/83/EC. Самих норм не так много, около 23 страниц (даже меньше), однако базовая интерпретация занимает 43 страницы. Документ целесообразно читать параллельно с самой директивой (статьи 6–39) и соответствующими статьями означенных выше регламентов. Все они находятся в открытом доступе на #PharmAdvisor.

В документе разъясняются требование о необходимости получения разрешения на вывод на рынок (т. е. регистрации), вопросы централизованной, децентрализованной, взаимного признания и национальной процедур; условной регистрации, регистрации особых групп лекарств; основания регистрации (оригинальный, смешанное досье, воспроизведенный, гибрид, биоаналог, хорошо изученное применение и др.); общие разъяснения по процедурам арбитража; вопросы исключительности данных и т. д.

Хорошая проработка документа позволит укрепить свои знания в области регуляторики и пойдет на пользу любому специалисту в нашей сфере.

Документ доступен в двуязычном формате (билингва), в котором английский оригинал и русская версия сопоставлены поабзацно. Это позволяет до конца осмыслить русскоязычный текст, подтянуть регуляторный английский и сверить правильность перевода.

#эволюция #общество #социология #биология #Christakis #Blueprint #Bill_Gates

Просматривая на днях ленту в ЛинкедИне, обратил внимание на пост, который лайкнул один из моих контактов. Это был пост Билла Гейтса, в котором он рекомендовал всем послушать книгу Николаса Кристакиса (Nicholas Christakis) Blueprint: The Evolutionary Origins of a Good Society. На тот момент я как раз находился в середине прослушивания.

В своей работе Blueprint: The Evolutionary Origins of a Good Society (Эскиз: эволюционные истоки хорошего общества) автор обобщает разрозненные исследования на людях (исторические неконтролируемые события, новые открытия в области зоологии, особенно биологии приматов, и различного рода современные эксперименты на сообществах людей), чтобы обосновать тезис, что появление сложного общества, в которым мы живем сейчас, является результатом естественного отбора в сторону повышения социализации, т. е. гены вносят важный вклад в социогенез (см. также в Мета-Ф #Christakis).

В книге Кристакис приводит интересный экскурс в историю кораблекрушений, когда спасшимся людям приходилось «заново строить общество» на необитаемых островах, чтобы дожить до времени прибытия помощи. Лишь немногим удавалось протянуть хотя бы пару месяцев не только из-за ограниченности ресурсов, но и из-за неспособности найти общий язык друг с другом, в итоге нередко люди умирали от убийств, нежели истощения. При прочих равных выживали уживчивые.

Также интересно описание социального поведения животных (см. также в Мета-Ф #приматология). Кристакис много цитирует Гудал, немного Сапольски и других приматологов. Однако общественная жизнь не ограничивается приматами. Она достаточно развита, в числе прочих, у слонов и китообразных, которые заботятся о своих больных или раненых сородичах, горюют по павшим членам их социумов. Интересно, что слоны, обезьяны и китообразные узнают себя в зеркале, нередко начинают кривляться перед ним; шимпанзе уделяют много времени рассмотрению своих гениталий и гримасничанью.

Показано, что многие аспекты социального поведения определяются различными генами или генными ансамблями. Например, полевые полевки известны своей моногамией, тогда как луговые полигамны. Оказалось, что это определяется вариантами гена вазопрессина. Если генетически модифицировать луговых полевок, пересадив им ген вазопрессина полевых полевок, то «отъявленные донжуаны становятся прилежными семьянинами». Люди находятся на перепутье между моногамией и полигамией (этот анализ глубже приводится у Сапольски), вероятно, именно это позволило сильно продвинуться в создании гетерогенных обществ (в отличие от гомогенных обществ пчел или муравьев).

Сильное чувство привязанности, возникающее при половом акте лицом к лицу, направлено на укрепление связи между мужчиной и женщиной и опосредуется окситоцином, который, также как и вазопрессин, вырабатывается задней долей гипофиза и тоже является гормоном социализации (это же может быть причиной увеличения относительно крупных и не уменьшающихся молочных желез). Укрепление этой связи позволяло формировать союзы, достаточно крепкие для совместного воспитания детей. Как пишет, Кристакис, многим, еврейским кибуццам, большевикам времен Сталина, китайцам в период Мао и другим, так и не удалось разрушить семейные связи во имя общества, ибо основы такого поведения диктуются генами (хотя в эпоху редактирования генома эта закономерность может быть скорректирована).

Одним из признаков эволюционного отбора в сторону социализации является уникальность наших лиц и феноменальная способность человека понимать выражение лиц других. Анатомия лица человека двигалась в сторону высокой диверсификации. Чем лучше понимание чужого выражения лица, тем легче взаимодействие. Причем такое взаимодействие важно не только в семье, но и с окружающими в коммуне. Уникальность лиц — уникальный признак людей.

И если хорошие взаимоотношения в семье в целом понятны и интуитивно очевидны (хотя, к примеру, у многих других животных самцы и самки не создают длительные союзы), то хорошие отношения человека с другими людьми, с которыми он не связан узами родства, также сыграли и продолжают играть большую роль в социализации. И нередко вклад в способность социализироваться вносят различные простые навыки, включая распознание лиц и мимики, чувство единения, получения удовлетворения от общения, что опосредуется сложным взаимодействием нейробиологических процессов, в становление которых вносят вклад гены (хотя упрощение здесь, конечно, не допустимо).

Книга хороша тем, что она позволяет по-новому взглянуть на наше общество, на происходящие в нем процессы взаимодействий, их влияние на культуру (и взаимное влияние культуры на общество). Например, появление в европейских обществах вариантов лактазы (фермента, метаболизирующего лактозу), продолжающих быть активными во взрослом состоянии, не просто позволило заполучить новый источник пищи, оно сильно трансформировало культуру в целом. Именно в Европе очень многое связано с потреблением молочных продуктов, тогда как, к примеру, в Азии, где ген лактазы перестает экспрессироваться в детстве, производство и потребление молока и молочных продуктов достаточно неразвито, а сырами особо никто не заворожен.

Хороший анализ продолжительностью 15 часов. Упоминание Билла Гейтса в начале, скорее, призвано сыграть роль гало-эффекта (см. #Канеман), поскольку лично я не считаю полезной рекомендацию о прочтении книги по эволюционной биологии от человека, занимавшегося разработкой программного обеспечения, хотя взаимодействие «человек — компьютер» требует понимания особенностей нашего взаимодействия с внешним миром.

#СМА #неврология #генная_терапия #Zolgensma #FDA #мошенничество

Спинальные мышечные атрофии (СМА ) — группа тяжелых неврологических расстройств, поражающих мотонейроны. Этиологией большинства СМА является нарушение в экспрессии гена SMN1 (полное отсутствие 7-го экзона (реже 8-го) в гомозиготном состоянии). В конце весны в США был зарегистрирован первый генотерапевтический препарат для полной коррекции генетического нарушения — онасемногена абепарвовек-xioi (Zolgensma). Важно помнить, что несмотря на многообещающие данные об эффективности, поскольку генетический дефицит устраняется только после рождения, пока неясно, как внутриутробный дефицит (с последующим его устранением) будет сказываться на функциональных возможностях в будущем. Более подробно см. на неврологическом канале @NrJClub # #спинальная_амиотрофия.

После того как препарат был одобрен, AveXis Inc., производитель Золджензмы, уведомил Администрацию по продуктам питания и лекарствам (FDA), что компания вскрыла манипуляцию результатами исследований на животных, проведенных одним из подрядчиков AveXis. Эти данные использовались для обоснования разработки процесса производства и были поданы в составе заявления о лицензировании биопрепарата (BLA).

Скорее всего, эти данные не влияют на конечную оценку клинической безопасности и эффективности, поскольку они использовались для инженерии процесса производства и не требовались для подтверждения эффективности как таковой. В связи с чем FDA пишет, что подобная манипуляция не изменяет положительное заключение Агентства, сформированное на основании проведенных клинических исследований на людях.

Вместе с тем FDA начала разбирательство, в том числе и по поводу того, что сведения о манипулировании были доведены до регулятора только после одобрения, хотя в AveXis знали о проблеме еще до принятия властями положительного решения. «Агентство воспользуется всеми своими полномочиями для принятия соответствующих мер, если они оправданны, которые могут включать гражданские иски или уголовное преследование».

#орфанный #регуляторика #RA #ЕС #регистрация #PharmAdvisor #лекарства

Базовый регламент Европейского союза по орфанным лекарственным препаратам в открытом доступе на русском языке

Сегодня мы выкладываем в открытый доступ Регламент (EC) № 141/2000 Европейского парламента и Совета от 16 декабря 1999 г. об орфанных лекарственных препаратах. Это ключевой документ, который закладывает основу для поддержки разработки и регистрации орфанных лекарственных препаратов, т. е. лекарственных препаратов для диагностики, профилактики или лечения редких заболеваний, поскольку в отсутствие стимулирующих мер разработка и выведение на рынок лекарств для этих заболеваний нередко экономически невыгодны.

Ознакомление с регламентом позволит понять подходы ЕС к поддержке разработчиков орфанных препаратов и увидеть, почему меры, содержащиеся в ФЗ-61 неэффективны, а именно: дано некорректное определение орфанного лекарственного препарата, отсутствуют меры научно-консультативной поддержки разработчиков, отсутствуют стимулирующие меры в виде программ финансирования разработок, отсутствуют меры стимулирования в виде исключительности данных (а это, согласно европейским регуляторам, самый эффективный инструмент поддержки) и т. д.

Следует обратить внимание, что отечественную меру «поддержки» в виде освобождения от необходимости локальных исследований правильнее рассматривать как создание еще более невыгодного положения для неорфанных лекарств, нежели стимулирующую меру для орфанных препаратов. Без мер, аналогичных европейским, вывод на наш рынок орфанных препаратов так и будет оставаться недостаточным.

Как всегда, полезно ознакомиться с преамбулой документа, в котором европейские власти излагают свое видение ситуации, стремления и чаяния для улучшения жизни пациентов с редкими заболеваниями путем поддержки разработки и вывода на рынок орфанных лекарственных препаратов. В частности, п. 2 преамбулы гласит:

«пациенты, страдающие от редких состояний, должны быть вправе на такое же качество лечения, что и другие пациенты; по этой причине необходимо стимулировать фармацевтическую отрасль на изыскания, разработку и выведение на рынок соответствующих лекарств; стимулирующие меры для разработки орфанных лекарственных препаратов существуют в Соединенных Штатах Америки с 1983 г., а в Японии — с 1993 г.».

Наконец, критерии номинации лекарственного препарата в качестве орфанного, изложенные в статье 3, лучше позволяют понять, какие цели преследует законодательство об орфанных лекарствах — повышение доступности лекарств, а не только помощь при орфанных заболеваниях, поскольку некоторые лекарства фактически являются орфанными (заброшенными) даже в случае болезней, которые не являются редкими.

Документ доступен в двуязычном формате (билингва), в котором английский оригинал и русская версия сопоставлены поабзацно. Это позволяет до конца осмыслить русскоязычный текст, подтянуть регуляторный английский и сверить правильность перевода.

#Attia #MDMA #Drive #Список_I

В понедельник к Питеру Атиа (поиск по Мета-Ф #Drive #Attia) приходил д-р Рик Доблин (Rick Doblin) — нейроученый и психиатр, занимающийся медицинским применением психоактивных веществ и борющийся за декриминализацию наркотических и психотропных веществ, включенных в регулируемые списки. В настоящее время д-р Доблин занимается оценкой эффективности MDMA (3,4-метилендиокси-N-метамфетамин, экстази; следует отличать от MDA).

Подобно другим психоактивным веществам, включенным в перечни, MDMA имеет достаточно интересную историю. Вместе с тем в отличие от многих других веществ его включение в список I (высокий риск злоупотребления + отсутствие показаний для медицинского применения) не обосновано, поскольку: (1) еще с 1970-80-х годов известно о его потенциальной пользе при посттравматическом стрессовом расстройстве, (2) его влияние на здоровье, риск злоупотребления и формирование зависимости, а также общественная опасность по сравнению с такими нерегулируемыми веществами, как алкоголь и никотин, гораздо меньше.

Интересна история о том, что от MDMA «садятся почки». Когда вещество стало популярно среди клубной молодежи в 1980-е годы, владельцы ночных клубов стали терпеть убытки, из-за того что резко снизился спрос на алкоголь (MDMA давал более мягкое опьянение с меньшим число нежелательных реакций). MDMA усиливает диурез, в результате чего повышается потребность в воде или напитках. Хотя бары и стали продавать бутилированную воду, люди просто стали ходить в туалет и пить воду бесплатно. Тогда некоторые владельцы клубов ограничили свободный доступ к воде в туалете, в результате возникло несколько случаев тяжелого обезвоживания, которым придали чрезмерное значение (на дворе стояла эпоха Рейгана).

Консервативное правительство быстро предложило начать регулировать вещество. Во время судебного процесса по отнесению MDMA к тому или иному перечню, когда практически состоялось его отнесение к перечню III, что позволило бы его использовать в медицинской практике, американская DEA (Drug Enforcement Agency), совместно с FDA регулирующая оборот наркотических и психотропных веществ, включенных в перечни, на основании ранее делегированных ей полномочий (отдельная «мутная» история), видя, что она проигрывает судебный процесс по отнесению MDMA к списку I, объявила чрезвычайное положения и в особом внесудебном порядке и без каких-либо объективных на то оснований включила его в список I.

Чтобы вещество исключить из этого перечня и перевести в менее строго регулируемый перечень, требуется доказать его клиническую пользу в рамках клинических исследований, которые для веществ из списка I достаточно сложно проводить, поскольку FDA неохотно согласует такие клинические исследования, постоянно оглядываясь на DEA. При этом DEA никоим образом не помогает ученым и исследователям оценить истинные свойства вещества, ее цель запретить, а не установление объективной правды. В этом отношении Питер Атиа даже отметил, что «складывается ощущение, что американские борцы с наркотиками сосредоточены исключительно на осложнении жизни другим людям и их вообще не заботят те сложности, которые возникают в связи с их нежеланием рассматривать объективные данные и вникать в ситуацию».

Невзирая на все эти сложности, MDMA в настоящее время изучается в клинических исследованиях III фазы (промежуточные данные обнадеживающие) и, возможно, в 2021 г. после формального признания FDA наличия у MDMA лекарственных свойств он может быть исключен из списка I и переведен в список III в США.

В подкасте продолжительностью 3 часа собеседники обсуждают многие другие интересные вопросы, включая лекарственные свойства MDMA, его профиль безопасности, регулирование наркотических и психотропных веществ, а также того, что необоснованно строгое регулирование в итоге приводит к страданию многих людей.

#биотехнология #биоаналоги #молекулярная_биология #CMC # Geigert

Читая третье издание The Challenge of CMC Regulatory Compliance for Biopharmaceuticals — книгу, написанную John Geigert (второе издание читал в 2015 г.), выяснил некоторые количественные характеристики, определяющие, почему каждый биологический препарат уникален с точки зрения своего состава.

Неточности в трансляции и транскрипции, многочисленные варианты посттрансляционных модификаций, условия процесса производства (в частности, условия культивирования) и работы с препаратом могут приводить к модификации отдельных молекул белка. Во время биосинтеза белка по завершении трансляции могут происходить различные модификации как с N-конца (например, циклизация глутамина в пироглутамат), так и C-конца (например, удаление лизиновых остатков) полипептидной цепи, а также внутри полипептидной цепи (например, гидролиз пептидной связи, окисление метионина, неправильное формирование дисульфидных связей между остатками цистеина, дезамидирование глутамина). Гликановые остатки, присоединяемые к различным участкам пептидной цепи, привносят значительную гетерогенность за счет различных моносахаридов, присоединяемых в разной последовательности, с разной длиной и ветвлением углеводных цепей. Более того, варианты структур более высокого порядка (начиная от димеров и видимых белковых агрегатов) дополнительно усложняют молекулярный состав рекомбинантных белков, включая моноклональные антитела. В совокупности такие модификации аминокислоты и гликановых структур могут приводить к образованию около 100 миллионов молекулярных вариантов моноклонального антитела (Kozlowski, S., and Swann P., Current and Future Issues in the Manufacturing and Development of Monoclonal Antibodies; Adv. Drug Deliv Rev. (2006) 58(5–6): 707–722).

В результате белковый препарат представляет собой смесь таких молекулярных вариантов. Интересно, что с регуляторной точки зрения, если модификация белка происходит на внутриклеточном этапе (включая гликозилирование), то все варианты собирательно составляют целевой продукт, если модификации происходит после выхода белка из клетки и приводят к образованию вариантов, схожих по профилю эффективности и безопасности (включая иммуногенность) с целевым продуктом, то такие варианты будут родственными веществами (не требующими нормирования или удаления). Если же образуемые под влиянием условий производства молекулярные варианты отличаются по профилю безопасности и эффективности от целевого продукта, то мы имеем дело с родственными примесями. Необходимо стремиться минимизировать содержание родственных примесей либо за счет оптимизации процессов культивирования, либо с помощью очистки.

Важно отметить, что многие варианты модификации первичной структуры не могут быть определены даже при использовании современной аналитической методологии, тогда как методы масс-спектрометрии, ВЭЖХ и капиллярного электрофореза позволяют определять все возрастающее число молекулярных вариантов, образуемых посредством других механизмов.

Все это важно как для оригинальных биомолекул, так и биоаналогов, когда задача производителя биоаналога состоит в максимальном воспроизведении вариантов, являющихся целевым продуктом. Очевидно, что поскольку целевой продукт — это миллионы молекулярных вариантов белковой молекулы, нельзя говорить о создании полных копий, ибо даже разные серии оригинального препарата не будут в точности повторять качественный и количественный профиль молекулярных вариантов целевого продукта, родственных веществ и родственных примесей от серии к серии. По этой причине некорректно говорить о копировании или создании генериков. Вместе с тем невозможность полностью скопировать профиль молекулярных вариантов не означает, что нельзя создать профиль, который позволял достигать тех же показателей безопасности и эффективности, хотя, конечно, нужно стремиться к минимальным отличиям между оригинальным биопрепаратом и биоаналогом. В связи с этим нельзя недооценивать важность оценки и обеспечения подлинности, чистоты и профиля родственных веществ и примесей биомолекул.

#сон #память #здоровье #работоспособность #настроение #долголетие #Walker #часть_I

После разговора Питера Атиа с Мэтью Уолкером о сне (поиск по Мета-Ф #сон), решил послушать его книгу Why We Sleep: Unlocking the Power of Sleep and Dreams (Почему мы спим: высвобождение силы сна и сновидений), а вчера закончил прослушивание. Matthew Walker — известный нейробиолог, изучающий проблемы сна и влияние недостаточного или некачественного сна на жизнь отдельных людей и общества в целом.

Автор начинает книгу с описания гипотетической ситуации. Врач сообщает роженице: «у вас родился прекрасный здоровый мальчик, и с ним все в порядке», и уже уходя добавляет: «но каждый день на протяжении всей жизни он будет терять сознание примерно на 8 часов в день, и мы не имеем ни малейшего представления, почему это происходит». Однако, по словам самого Уолкера, современные достижения в области нейробиологии позволяют нам несколько лучше понимать значение сна и важность полноценного сна для здоровья и благополучия человека.

Сон или его эквивалент есть у (почти) всех животных (Animalia), по меньшей мере начиная от насекомых и заканчивая китообразными. Он может происходить с разной продолжительностью и цикличностью. Рекордсменом является вид летучих мышей, которые спят около 19 часов в сутки. Китообразные спят, «отключая» половину коры головного мозга за эпизод сна. Продолжительность сна у человека в среднем составляет 8 часов. Эксперименты по изучению сна у животных заслуживают отдельного описания, но здесь приведены не будут 😊

Циркадные ритмы, т. е. смена циклов «сон — бодрствование», регулируются надперекрёстным (супрахиазмальным) ядром, в гипоталамусе (проецируется чуть переносицы). Инициатором начала подготовки ко сну является мелатонин, секреция которого и регулируется этим ядром и начинается с наступлением темноты (исчезновением коротких (синего цвета) волн из солнечного света, что происходит на закате). Интересно отметить, что мелатонин только сигнализирует, но не участвует нейробиологических процессах засыпания и поддержания сна («он словно выстреливающий на старте арбитр, сигнализирующий для бегунов начало забега, но сам не бежит»). Именно поэтому мелатонин является плохим снотворным, подвергается сомнению его влияние на качество сна. Вместе с тем он может быть полезен при джетлагах (десинхроноз), а также при некоторых формах бессонницы у людей пожилого возраста (предположительно компенсация дегенерации нейронов супрахиазмального ядра в преклонном возрасте).

Сам сон запускается за счет накопления аденозина во время бодрствования, который во все возрастающих количествах, воздействуя на аденозиновые рецепторы, запускает сон (при такой возможности), когда накоплена критическая масса аденозина в головном мозге. Во время сна количество аденозина снижается (клиренс), в результате к концу сна его становится мало (тогда же под воздействием освещения восходящего солнца прекращается синтез мелатонина), в результате наступает пробуждение (однако это не единственные механизмы прекращения сна/пробуждения).

Блокатором аденозиновых рецепторов является кофеин (он же триметилксантин). Не давая накопившемуся аденозину связаться с рецепторами, он прогоняет сон. Однако такое искусственное бодрствование создает лишь мнимое ощущение благополучия…

Продолжение следует

#сон #память #здоровье #работоспособность #настроение #долголетие #Walker #часть_II

Cон — естественный механизм восстановления работоспособности высшей нервной деятельности, включая консолидацию памяти, балансирование/настройку эмоций и т. д. Во время сна также происходят другие важные биохимические и физиологические процессы, включая иммунологический надзор, восстановление после стресса, рост и др. Устранение сонливости с помощью кофеина за счет блокады аденозиновых рецепторов не позволяет решить другие проблемы дефицита сна (например, снижение внимательности или способности усваивать новую информацию). Накопление аденозина все равно продолжается, поскольку кофеин лишь блокирует аденозиновые рецепторы, но не влияет на само содержание аденозина. Как только кофеин метаболизируется, обычно наступает еще более выраженная сонливость.

Здесь также следует учитывать индивидуальную чувствительность аденозиновых рецепторов к кофеину, вырабатываемое количество аденозина, активность фермента, метаболизирующего кофеин (это изофермент CYP1A2 печени). Интересно было узнать что указание «без кофеина» для кофейных напитков означает не полное отсутствие кофеина. В них обычно сохраняется до 15–30 % от обычной дозы, а не 0. Т. е. 3 порции кофе без кофеина позволяют получить столько же кофеина, сколько в обычном кофе с кофеином.

Также интересны были данные о совах и жаворонках. На сегодняшний день одна из теорий существования людей, (1) просыпающихся очень рано и ложащихся очень рано, (2) просыпающихся очень поздно и ложащихся очень поздно, и (3) находящихся в промежутке между 1 и 2, строится на эволюции человеческих сообществ в на ранних этапах антропогенеза. Смысл существования всех трех категорий в том, что сообщество нужно было охранять от хищников, агрессоров и других опасностей постоянно. Наличие сов и жаворонков, позволяло минимизировать время (глубокая ночь — раннее утро), когда группа людей в полном составе находилась без сознания из-за сна.

На сегодняшний день «совы» нередко страдают из-за их естественной предрасположенности к позднему пробуждению и засыпанию, поскольку наше общество во многом построено для удобства «жаворонков». Существование циркадных ритмов как бы игнорируется, также как и различие людей по этому признаку. По данным автора, ряд исследований свидетельствуют, что среди «сов», вынужденных жить не своем режиме, при прочих равных выше заболеваемость сердечно-сосудистыми, психическими и онкологическими заболеваниями. Вместе с тем в некоторых странах предпринимаются попытки по исправлению ситуации, однако это очень сложно в условиях крупных производств. Помимо личных проблем, это также и источник проблем для экономики из-за возникновения непроизводственных потерь вследствие использования труда не выспавшихся людей, т. е. людей, не способных работать и творить с полной отдачей.

На сегодняшний день более-менее четко установлены основные нейробиологические функции сна, в том числе на основании различных естественных и лабораторных экспериментов по лишению людей сна. Сон имеет 2 фазы: (1) без быстрого движения глаз (глубокий сон) и (2) с быстрым движением глаз (rapid eye movement, REM-сон; в это время снятся).

Обе фазы важны. Во время глубокого сна проходят основные процессы восстановления биохимических возможностей нейронов. Считается, что время глубокого (не-REM-сна) происходит консолидация декларативной памяти, человек находится в расслабленном состоянии, не парализован.

Однако ряд современных теорий предполагает, что интеллектуальные достижения человека во многом стали возможны благодаря REM-сну (во время которого в числе прочего происходит консолидация процедурной, пространственной и эмоциональной памяти). Ни у какого другого животного не отмечаются столь продолжительные эпизоды REM-сна.

Продолжение следует